[发明专利]一种干扰素α2b可溶性重组表达和分离纯化方法及其应用在审
| 申请号： | 202210630705.6 | 申请日： | 2022-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN116120424A | 公开（公告）日： | 2023-05-16 |
| 发明（设计）人： | 华子春;胡敏进 | 申请（专利权）人： | 江苏靶标生物医药研究所有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/56 | 分类号： | C07K14/56;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;C12N15/70;C12N15/66;C12N15/21;A61K38/21;A61P1/16;A61P31/22;A61P31/20;A61P35/00;A61P35/02 |
| 代理公司： | 江苏银创律师事务所 32242 | 代理人： | 何震花 |
| 地址： | 213164 江苏省常州市武进区常*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种干扰素α2b可溶性重组表达和分离纯化方法及其应用，包括如下步骤：(1)PCR扩增目的基因；(2)将原核表达载体pET28a(+)和PCR合成的DNA片段均经NcoI和XhoI进行双酶切；(3)IFNα2b基因片段经PCR扩增和双酶切，与同样经双酶切的pET28a载体连接，转化到Top10感受态细胞中，菌落PCR筛选为阳性的菌落，进行质粒提取，并进行NcoI和XhoI双酶切鉴定，将测序正确的质粒，转化感受态细胞BL21(DE3)；挑取单克隆，制得表达干扰素α2b的工程菌株IFNα2b/BL21(DE3)。干扰素α2b表达菌株破菌后，经硫酸铵沉淀，四步离子交换和疏水层析、以及超滤等分离纯化。本发明表达和纯化的重组人干扰素具有良好的效率、回收率和活性，产品质量远高于国家药典规定的质量标准。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 干扰素 可溶性 重组 表达 分离 纯化 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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