[发明专利]高效精准替换红色毛癣菌基因的方法在审
| 申请号： | 202210633903.8 | 申请日： | 2022-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN115651933A | 公开（公告）日： | 2023-01-31 |
| 发明（设计）人： | 陈柏叡;孙毅;吴小末;张金燕 | 申请（专利权）人： | 福州市皮肤病防治院 |
| 主分类号： | C12N15/90 | 分类号： | C12N15/90;C12N15/31 |
| 代理公司： | 焦作加贝专利代理事务所(普通合伙) 41182 | 代理人： | 任昕 |
| 地址： | 350025 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种高效精准替换红色毛癣菌基因的方法，包括如下步骤：设计红色毛癣菌中EFG1基因片段的上游引物和下游引物序列，并进行扩增；提取PAN7‑1质粒的DNA后，使用引物进行扩增，得到HPH试剂；将扩增后的上游序列、扩增后的下游序列和HPH试剂通过引物进行扩增融合，得到融合的PCR产物；将使用果胶酶制备的原生质体和融合的PCR产物进行转化融合；提取转化子的DNA后，设计引物进行扩增，并验证转化产物；本发明使用果胶酶作为分解酶，可有效对红色毛癣菌细胞壁进行分解，增加外源DNA的渗透率，同时，也避免了由于电能导致多次整合频率的短板，可更加精准地替换靶向基因，取得基因敲除的转化子菌株。 | ||
| 搜索关键词： | 高效 精准 替换 红色 毛癣菌 基因 方法 | ||
【主权项】：
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