[发明专利]一株NADC34-like猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作平台的构建与应用

摘要

本发明涉及一株NADC34‑like PRRSV2的反向遗传操作构建的病毒。具体包括以pACY177质粒为载体，利用PCR扩增、酶切连接等方法将NADC34‑like PRRSV2 BJ1805‑2分离株的全基因序列分段连接到载体上，获得BJ1805‑2全长感染性克隆重组质粒（rBJ1805‑2）。体外拯救了感染性克隆病毒rBJ1805‑2，成功搭建了我国首个NADC34‑like PRRSV2毒株感染性克隆平台。本发明还涉及一种构建可适应Marc‑145细胞传代培养NADC34‑like PRRSV2毒株的改造方法。本发明所构建的感染性克隆病毒有良好的体内外增殖效力，接种猪体可以引起特异性病毒血症；具有良好的安全性，接种猪体后不引起发热，更不会引起仔猪死亡。所改造毒株可作为候选毒株用于研制我国首个NADC34‑like PRRSV2特异性疫苗，有利于我国PRRSV疫情的防控。