[发明专利]一种mRNA 3`末端测序文库快速构建方法及应用在审

专利信息
申请号: 202211552277.6 申请日: 2022-12-05
公开(公告)号: CN115960987A 公开(公告)日: 2023-04-14
发明(设计)人: 肖锐;夏应丹;秦文英 申请(专利权)人: 武汉大学
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;C12Q1/6869;C40B50/06;C40B40/08;C12N15/11
代理公司: 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 代理人: 常海涛
地址: 430072 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要: 发明公开了一种mRNA 3'末端测序文库快速构建方法及应用。本发明方法包括如下步骤:采用逆转录引物对片段化的RNA进行逆转录,获得cDNA第一链产物;cDNA第一链使用连接酶连接环化,环化产物再用核酸内切酶酶切进行线性化,线性化产物进行PCR扩增,得到mRNA 3′末端测序文库。所述逆转录引物从5′端至3′端包括与测序引物配对的序列、一个脱碱基位点dSpacer、与测序引物配对的序列、UMI、oligo dT、脱氧核苷酸VN,5′末端带有PO4修饰。本发明效率高,操作简单,样品损耗少,能以低浓度样品得高质量clean reads,在基础研究、临床诊断、药物研发等领域有广泛应用。
搜索关键词: 一种 mrna 末端 序文 快速 构建 方法 应用
【主权项】:
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