[发明专利]免疫磁分离结合实时荧光定量PCR的检测方法及其在食源性致病菌快速检测中的应用在审
| 申请号： | 202211718593.6 | 申请日： | 2022-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN115932259A | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 张小凤 | 申请（专利权）人： | 南京北极光质检技术服务有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543;C12Q1/06;C12Q1/689;C12Q1/6851;C12R1/445 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市栖霞区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了免疫磁分离结合实时荧光定量PCR的检测方法及其在食源性致病菌快速检测中的应用，包括：(1)免疫磁珠制备：用无菌PBS洗涤羧化MNPs，然后在含有EDC和NHSS的无菌PBS中，以激活羧基去除多余的活化试剂；将PEI加入活化MNPs中，偶联；去除多余PEI；清洗并再次悬浮PBS中；(2)将菌液与PEI‑MNPs混合，孵育，形成细菌‑PEI‑MNPs复合物；(3)然后将上清液和细菌‑PEI‑MNPs复合物分别在相应平板上培养，进行细菌计数；(4)目的基因提取后，采用实时荧光定量PCR。可以将食品中的致病菌非特异性富集出来，方便后续检测；实时荧光定量PCR相比较于普通PCR检测灵敏度更高，特异性好；本发明的方法能够应用于食源性致病菌的快速检测。 | ||
| 搜索关键词： | 免疫 分离 结合 实时 荧光 定量 pcr 检测 方法 及其 食源性 致病菌 快速 中的 应用 | ||
【主权项】：
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