[发明专利]一种体外快速合成环状DNA的方法在审
申请号: | 202310017485.4 | 申请日: | 2023-01-06 |
公开(公告)号: | CN116004610A | 公开(公告)日: | 2023-04-25 |
发明(设计)人: | 贺权源;左珊如;周军华 | 申请(专利权)人: | 湖南师范大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 长沙智路知识产权代理事务所(普通合伙) 43244 | 代理人: | 张毅 |
地址: | 410013 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明提出了一种体外快速合成环状DNA的方法,属于基因工程技术领域。包括:S1.以基因组为模板,针对所需合成环状DNA对应的线性DNA片段分别设计正向引物和反向引物进行PCR,产生线性DNA‑A片段;S2.以DNA‑A片段为模板,分别设计引物产生1/2A片段;S3.将1/2A片段进行梯度退火,产生黏性1/2A片段;S4.用T7连接酶连接黏性1/2A片段;S5.以黏性1/2A片段为模板,再进行PCR,产生DNA‑E片段;S6.将DNA‑A片段和DNA‑E片段经过TaqDNA Ligase试剂进行成环反应。本发明可成功构建特定序列单个eccDNA,可合成长链高浓度eccDNA,经济快速。 | ||
搜索关键词: | 一种 体外 快速 合成 环状 dna 方法 | ||
【主权项】:
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