[发明专利]一种光调控的单分子CRISPR-Cas检测方法及试剂盒在审
| 申请号： | 202310084972.2 | 申请日： | 2023-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN116287128A | 公开（公告）日： | 2023-06-23 |
| 发明（设计）人： | 周小明;舒博文;田甜;胡梦露;张冰妮 | 申请（专利权）人： | 华南师范大学;南方医科大学皮肤病医院（广东省皮肤病医院;广东省皮肤性病防治中心;中国麻风防治研究中心） |
| 主分类号： | C12Q1/6816 | 分类号： | C12Q1/6816;C12N15/113;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州骏思知识产权代理有限公司 44425 | 代理人： | 邓仲欢 |
| 地址： | 510631 广东省广州市天河*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种光调控的单分子CRISPR‑Cas检测方法及试剂盒。所述检测方法包括：S1、提供CRISPR反应体系和封闭序列，配置成预混反应液；S2、将包含目标核酸的待测物与预混反应液混合得到混合体系，并将该混合体系分散至大量体积均一的微反应单元；S3、UV光照，并孵育微反应单元；S4、读取荧光信号，计算目标核酸的含量。封闭序列能够与CRISPR反应体系中的Cas效应蛋白稳定结合以沉默该蛋白活性，且封闭序列中的光致断裂基团在光照后断键，并与Cas效应蛋白分离，而使其活性去沉默，这种光调控的方式能够使每个微反应单元中的CRISPR催化体系在同一时刻启动，避免了在微反应单元分配完成前少量Cas蛋白被激活降解待测靶标和报告探针从而引起的背景信号升高和定量不精确的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 调控 分子 crispr cas 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
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