[发明专利]一种基于底物导流原理的催化斯替维醇糖基化的双功能融合酶体系构建与制备方法在审

专利信息
申请号: 202310132812.0 申请日: 2023-02-20
公开(公告)号: CN116286707A 公开(公告)日: 2023-06-23
发明(设计)人: 王小强;刘承琨;李丽娜;李计强;黄方 申请(专利权)人: 中国石油大学(华东)
主分类号: C12N9/10 分类号: C12N9/10;C07K19/00;C12N15/54;C12N15/62;C12N15/81;C12P19/56;C12R1/84
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 266580 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 发明提出了一种基于底物导流原理和计算机辅助对UGT91C1‑UGT76G1融合酶进行构建,并结合生物工程手段重组制备具有高效催化斯替维醇糖基化性能的该融合酶的方法,确定(GGGGS)2多肽序列适宜于介导UGT91C1融合在UGT76G1的C末端,并利于中间产物直接转化为产品,而避免中间体向体相扩散。UGT91C1‑UGT76G1融合酶的基因序列为Seq ID NO.1,命名为ugt91C1‑ugt76G1,蛋白质一级序列为Seq IDNO.2。本发明还公开了ugt91C1‑ugt76G1基因合成、重组质粒构建、异源表达、纯化及催化性能表征的方法,所得UGT91C1‑UGT76G1催化级联反应的效率高,其制备更加集约经济,可以减少级联反应中间产物分离和纯化等单元操作,产生较少的废物,更加符合绿色化学合成理念,具有良好的工业催化转化应用前景。
搜索关键词: 一种 基于 导流 原理 催化 斯替维醇糖基化 功能 融合 体系 构建 制备 方法
【主权项】:
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