[发明专利]mRNA加帽酶及其制备方法与应用在审

专利信息
申请号: 202310303706.4 申请日: 2023-03-27
公开(公告)号: CN116355934A 公开(公告)日: 2023-06-30
发明(设计)人: 卢元;陈鑫杰 申请(专利权)人: 清华大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12N9/14;C12N9/12;C12N9/10;C07K19/00;C12N15/10;C12R1/19
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 张立娜
地址: 100084 北京市海淀区1*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明公开了mRNA加帽酶及其制备方法与应用。本发明提供了一种制备可溶性mRNA加帽酶的方法,包括:将融合了MBP标签的蓝舌病毒、浮病病毒、非洲猪瘟病毒或小球藻病毒来源的加帽酶编码基因导入大肠杆菌受体细胞,对所得重组大肠杆菌进行诱导表达,收集菌体裂解,离心后从上清液中获得所述融合蛋白,即为可溶性mRNA加帽酶。本发明进一步构建了T7体外转录体系,进行加帽效果验证,结果发现来源于蓝舌病毒和浮病病毒的mRNA加帽酶被证明拥有比牛痘病毒加帽酶VCE更高的加帽活性。其中,来源于蓝舌病毒的mRNA加帽酶的活性要比VCE高出38%。本发明对于增强线形mRNA的稳定性并提高其在体内的翻译效率具有重要意义。
搜索关键词: mrna 加帽酶 及其 制备 方法 应用
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