[发明专利]一种利用长引物快速从头合成目的片段的方法在审
申请号: | 202310534971.3 | 申请日: | 2023-05-12 |
公开(公告)号: | CN116426559A | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 仲森林;黄利平;祁映璇;管景灏;姚瑶;费正月;刘冠楠 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N15/64;C12R1/19 |
代理公司: | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人: | 仲凌霞;肖明芳 |
地址: | 210009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用长引物快速从头合成目的片段的方法,包括如下步骤:(1)设计合成多条存在碱基重叠、覆盖整个目的片段的长引物;(2)使用偶数条步骤(1)获得的长引物交替重叠延伸进行PCR扩增,获得PCR产物;(3)利用一步法同源重组将步骤(2)获得的PCR产物直接整合到线性化载体中,得到重组产物;(4)将步骤(3)获得的重组产物转化入感受态细胞,获得带有目的基因的转化子;所述方法从目的基因中长引物的设计到最终产品耗时2~5h。本发明所提供的方法适用于长片段DNA快速合成,具有合成周期短,正确率高的特点,适用于具有高G+C含量、重复序列或复杂的二级结构的DNA合成。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 引物 快速 从头 合成 目的 片段 方法 | ||
【主权项】:
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