[发明专利]水稻DNA启动子顺序的克隆方法无效
申请号: | 88107497.7 | 申请日: | 1988-11-08 |
公开(公告)号: | CN1042565A | 公开(公告)日: | 1990-05-30 |
发明(设计)人: | 任大明;何超刚;卢勤;石红;陈永钢 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/16;C12N1/20;C12P19/34;A01H1/00 |
代理公司: | 复旦大学专利事务所 | 代理人: | 陶金龙 |
地址: | 上海市邯郸*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 以既能在大肠杆菌又能在酵母菌中复制、同时又带有一个缺乏启动子的Lacz基团的穿梭质粒pCH1作为克隆水稻总DNA、叶绿体DNA的启动子顺序的载体。用牛小肠碱性磷酸酯酶处理酶切后的载体DNA,有效地防止了细菌染色体DNA的污染和载体自身的环化,提高了重组频率。本发明采用X—gal平皿筛选法,具有灵敏、分辨力高等优点。 | ||
搜索关键词: | 水稻 dna 启动子 顺序 克隆 方法 | ||
【主权项】:
1、一种由供体DNA及载体DNA经酶切、混合、连接、检测等过程组成的筛选启动子DNA顺序的克隆方法,其特征在于:上述的供体DNA采用水稻总DNA,上述的载体DNA为带有lacZ结构基因的PCH1质粒DNA,其中载体DNA用牛小肠碱性磷酸酯酶处理,DNA供体与载体DNA的混合比为2∶1~5∶1,上述的检测采用含有X-gal的平皿筛选法。
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