[发明专利]用组培获得100％不育群体的白菜制种技术

摘要

一种白菜一代杂种制种新技术，取白菜不育株种子或植株任何部位，经表面消毒，在无菌条件下接种到培养基中，培养5-7天，切其顶芽转入另一培养基，诱导产生不定芽，再将不定芽转接到生根成苗培养基，形成根即可移栽。本发明可获得100％的不育系，使杂交率达到100％，且方法简单易行，亲本来源广泛，有利于工厂化生产，从而扩大了白菜一代杂种亲本的利用范围。

主权项

1、一种利用组织培养获得白菜100％不育群体生产一代杂种种子的方法，包括采取适期移栽，合理密植，适宜行比，其特征在于：(1)取白菜不育株的种子或侧芽，经表面消毒，在无菌条件下接种在88-13或88-52或C.C-1或C.C-1A基本培养基中，该培养基另加6BA(或KT)3.0-5.0mg/L，NAA(或IAA)0.1-0.5mg/L，活性炭0.15-0.50％，培养5-15天后生长成幼苗；(2)在无菌条件下，将幼苗顶芽切下，接种在88-13或88-52或C.C-1或C.C-1A基本培养基中，该培养基另加6BA(或KT)2.0-4.0mg/L，NAA(或IAA)0.1-1.0mg/L，诱导产生不定芽，当不定芽长至2-3厘米高时，将不定芽切下转到上述相同培养基中进行继代培养，一般每隔10-20天继代一次；(3)在无菌条件下，将长至2-3厘米高的不定芽转到88-13或88-52或C.C-1A或C.C-1基本培养基中进行生根培养，该培养基另加6BA(或KT)1.0-4.0mg/L，NAA(或IAA)0.5-1.0mg/L，活性炭0.15-0.50％，培养20天后，形成具根可移栽的试管苗；(4)将试管苗移栽到装有营养土的培养钵内，经过栽培管理，形成正常开花的不育群体；(5)试管苗培养条件为：温度白天为18-24℃，夜间为10-15℃，光照为1000-2000勒克司，每天光照10小时；(6)88-13、88-52、CC-1A和CC-1培养基如下：C.C-1A培养基成分为：化合物毫克/升NH4NO31500-1800mg/L(或NH4SO3)120-500mg/LCaCl2·2H2O150-650mg/LMgSO4·7H2O250-450mg/LKNO3300-2500mg/LKH2PO4150-400mg/L(或Na2PO4)120-175mg/LZnSO4·7H2O4-15mg/LH3BO33.8-15mg/LMnSO4·4H2O10-35mg/LCuSO4·5H2O0.01-0.04mg/LNa2MoO4·2H2O0.1-0.35mg/LKI0.5-0.9mg/LCoCl0.01-0.04mg/LC10H14N2O9Na2·2H2O6.50-7.95g/LFeSO4·7H2O5.10-5.95g/L盐酸噻胺0.2-0.7mg/L盐酸吡哆素0.2-0.75mg/L叶酸0.25-0.80mg/L肌醇80-125mg/L烟酸2.0-7.0mg/L甘氨酸0.50-4.00mg/L生物素0.02-0.09mg/L蔗糖(或葡萄糖)3％琼脂0.4-0.8％pH5.8其中：C10H14N2O8Na2·2H2O6.50-7.95g/L、FeSO4·7H2O5.10-5.95g/L分别溶解，定溶于1升水，每升培养基取此母液5毫升。88-13培养基为：化合物毫克/升NH4NO31650mg/LCaCl2·2H2O440mg/LMgSO4·7H2O370mg/LKNO31900mg/LKH2PO4170mg/LZnSO4·7H2O10mg/LH3BO210mg/LMnSO4·4H2O25mg/LCuSO4·5H2O0.025mg/LNa2MoO4·2H2O0.25mg/LC10H14N2O8Na2·2H2O7.45g/LFeSO4·7H2O5.57g/L盐酸噻胺0.5mg/L盐酸吡哆素0.5mg/L叶酸0.5mg/L肌醇100mg/L烟酸5mg/L甘氨酸2mg/L生物素0.05mg/L蔗糖3％