[发明专利]核酸的衔接线性扩增无效

专利信息
申请号: 94192853.5 申请日: 1994-07-25
公开(公告)号: CN1127533A 公开(公告)日: 1996-07-24
发明(设计)人: 罗伯特·布鲁斯·华莱士 申请(专利权)人: 伯乐实验有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12P19/34;C07H21/02;C07H21/04
代理公司: 永新专利商标代理有限公司 代理人: 刘国平
地址: 美国加利*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 通过一系列衔接的多循环的引物延伸反应(LLA)获得所感兴趣的核酸序列的大量合成(扩增)。本方法中每个引物延伸反应所使用的引物包含终止核酸的合成,从而防止合成分子成为随后循环的模板的非复制性因子。合成的分子在引物延伸中以数学线性方式积聚,因此使本方法对污染的核酸不敏感。应用了多套引物,因此确保所感兴趣的核酸序列拷贝的大量积聚。本发明还提供对扩增后的所感兴趣核酸序列的检测,以及进行反应的试剂盒。
搜索关键词: 核酸 衔接 线性 扩增
【主权项】:
1、一种用于扩增包含在互补核酸链中的所感兴趣核酸序列的方法,包括:(a)在一定条件下,将链与包含一个非复制性因子的引物接触,以便以所述的链为模板合成第一代引物延伸产物;其中,链的引物的选择是使在该引物上合成的第一代引物延伸产物在与链分离后,能作为模板用于合成与所述链互补的引物的第二代引物延伸产物;(b)将第一代引物延伸产物从其相应的模板上分离开从而产生单链分子;和(c)在一定条件下,将第一代引物延伸产物用(a)步骤的引物处理,从而以第一代引物延伸产物为模板合成第二代引物延伸产物;其中,第二代引物延伸产物至少包含一部分所感兴趣的核酸序列,并且不能作为延伸后合成其模板的引物合成引物延伸产物的模板。
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