[发明专利]Leber氏遗传性视神经病变检测方法及其试剂盒无效

专利信息
申请号: 96116296.1 申请日: 1996-04-01
公开(公告)号: CN1143117A 公开(公告)日: 1997-02-19
发明(设计)人: 周海林;邹祝英;胡育新 申请(专利权)人: 中国人民解放军第二军医大学
主分类号: C12Q1/00 分类号: C12Q1/00;C12Q1/44
代理公司: 中国人民解放军第二军医大学专利标事务所 代理人: 丁振英
地址: 20043*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明是一种临床检测Leber氏遗传性视神经病变的方法及其试剂盒。根据本病患者存在线粒体点突变致使正常线粒体DNA中限制性内切酶SfaNI识别位点丧失的特点,利用特定的抗凝剂、溶血液和一对引物,经PCR扩增后的产物不能被SfaNI限制性内切酶消化切割而检测本病。本发明的有益效果是解决了以往只能靠家族遗传史来诊断Leber氏遗传性视神经病变的问题,为临床明确检测本病提供了一种简便、可靠的方法和试剂盒。
搜索关键词: leber 遗传性 视神经 病变 检测 方法 及其 试剂盒
【主权项】:
1、一种临床检测Leber氏遗传性视神经病变的试剂盒,其特征在于由抗凝剂、溶血液、一对引物、dNTP、TaqDNA多聚酶、10×Buffer、SfaNI限制性内切酶、NEBuffer3各一管组成,具体为:(1.1)特定抗凝剂EDTANa22gNaCl0.85g加水至100ml(1.2)一对引物各一管5′AGCCCTCGTAGTAACAGCCA-3′轻链POS.11641~11660,每微升500纳克。5GGAGTATAGGGCTGTGACTA-3′重链POS.11980~11961,每微升500纳克。(1.3)dNTPdNTP200毫微克;(1.4)TaqDNA多聚酶;TaqDNA多聚酶1.2单位:(1.5)10×Buffer10×Buffer5微升;(1.6)SfaNI限制性内切酶SfaNI(NewEnglandBiolabs产)(1.7)NEBuffer3NEBuffer3(NewEnglandBiolabs产)′(1.8)溶血液:Tris-Hcl10mmol/L.pH7.5NaCl10mmol/L,MgCl25mmol/L。
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